中医药在疾病的诊疗方面积累了大量临床经验，其中以麝香保心丸（SBP）为代表的中成药广泛用于冠心病的治疗。年1月，历时10年的麝香保心丸MUST研究结果正式发布，该研究再次明确了SBP治疗慢性稳定型冠心病的疗效和安全性。近期有学者发现，SBP可能改善阿尔兹海默症（Alzheimer’sdisease，AD）患者的认知功能障碍。
年7月14日,《FrontiersinPharmacology》发表了一项原创性研究，揭示SBP可以改善APP/PS1转基因小鼠的认知功能障碍，该研究进一步拓展了SBP的药理学功能，从而为其在神经病学领域中的应用奠定了理论基础。
在介绍该项研究之前，先简单介绍一下AD的主要发病机制，以帮助读者更容易理解本项研究。AD是一种最常见的老年痴呆症，学习和记忆能力急剧下降是其典型特征。AD的确切病因尚不完全清楚，目前认为，β淀粉样蛋白（Aβ）变性是其重要的病理变化，Aβ纤维聚集具有神经*性，因此被认为是AD发病的重要致病事件之一，探索如何减轻甚至消除Aβ纤维聚集有望攻克AD。
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SBP能够抑制Aβ单体聚集，从而减轻其细胞*性作用
PC12细胞系是一种来源于大鼠肾上腺髓质的细胞，既往研究显示，SBP的酒精萃取物（SBPEtOH）和水萃取物（SBPwater）能够有效诱导PC12细胞系的分化。
麝香保心丸主要的药物组成包括麝香（Moschus）、人参（GinsengRadixetRhizoma）、人工牛*（BovisCalculusArtifactus）、肉桂（CinnamomiCortex）、苏合香（Styrax）、蟾酥（BufonisVenenum）和冰片（BorneolumSyntheticum）等；为了研究SBP萃取物（SBPEtOH或SBPwater）或以上各成分对Aβ聚集的影响，将Aβ单体在37℃条件下分别与姜*素（阳性对照）以及以上萃取物或7种成分一起孵育6天，结果发现，人工牛*、冰片及苏合香均对Aβ积聚没有影响。其余成分或者萃取物均可显著抑制Aβ聚集（图1A）。
为明确Aβ聚集物与药物一起老化的细胞*性影响，将Aβ单体在37℃条件下分别与姜*素（阳性对照）以及以上萃取物或7种成分一起孵育6天，随后与PC12细胞一起孵育48h，结果显示，Aβ可显著降低细胞活力，而肉桂、麝香及人参可减轻Aβ的*性作用（图1B）。以上结果表明，SBP能够抑制Aβ单体积聚，并减轻其细胞*性作用。
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SBP能够改善行为障碍
接着，作者评估SBP对AD小鼠的影响。首先利用APP/PS1转基因小鼠构建AD小鼠模型，利用Morris水迷宫试验来评估小鼠空间学习和记忆的功能（图2A）。结果发现，从58天开始，高剂量SBP治疗将APP/PS1转基因小鼠寻找平台的平均潜伏期显著缩短了约50%（图2B）；随后，作者还测量了训练期间的总游泳距离（游出水迷宫的总游泳距离）、游泳速度和靠近墙的时间，结果发现，随着服药时间延长，高剂量SBP还可显著降低小鼠的总游泳距离（图2C）和靠近墙的时间（图2D），但对游泳速度没有影响（图2E）。提示SBP可以改善AD小鼠的空间学习和记忆能力。
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SBP能够改善APP/PS1小鼠的病理学改变
在进行功能实验之后，小鼠被进行了安乐死，脑组织被取出来进行组织切片，随后进行HE染色和免疫组化染色，重点对大脑皮层和海马区进行分析。结果发现，与对照组相比，APP/PS1转基因小鼠在大脑皮层中显示出高水平的Aβ斑块，提示造模成功，同时，低剂量和高剂量的SBP治疗分别抑制小鼠脑中斑块形成约40%和约60%，并且与对照相比具有显著统计学差异（P＜0.05）（图3）。
作者还分析了SBP对APP/PS1转基因小鼠海马神经元核固缩的影响，结果显示，与对照组小鼠相比，APP/PS1转基因小鼠中发生核固缩的神经元数量增加了约13倍，而低剂量和高剂量的SBP给药可将模型组核固缩的神经元数量显著减少2倍以上（图4）。
接着，作者研究了SBP对AD小鼠脑生物标志物（即NO、NOS和AChE）的蛋白质水平的抑制作用，结果显示，SBP治疗显著降低APP/PS1转基因小鼠脑中NO、NOS和AChE的表达（图5）；此外，ELISA试验还发现，SBP可显著降低小鼠血清中IL-6和TNF-a水平（图5）。
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SBP通过抗凋亡途径发挥神经保护作用
最后，作者以凋亡为方向，探索了SBP发挥神经保护作用的可能分子机制。利用RT-PCR检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl2的转录水平变化，利用westernblotting检测Aβ以及Bax和Bcl2蛋白水平变化；结果发现，SBP可显著抑制细胞凋亡过程，提示SBP通过抗凋亡效应来发挥其神经保护作用（图6）。
参考文献：
1.GeJB,FanWH,ZhouJM,etal.EfficacyandsafetyofShexiangBaoxinpill(MUSKARDIA)inpatientswithstablecoronaryarterydisease:amulticenter,double-blind,placebo-controlledphaseIVrandomizedclinicaltrial.ChinMedJ(Engl).;(2):-.
2.HuWH,MakSH,ZhengZY,etal.ShexiangBaoxinPill,aTraditionalChineseHerbalFormula,RescuestheCognitiveImpairmentsinAPP/PS1TransgenicMice.FrontPharmacol.;11:-.
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